A che cosa serve
Streaking separa cultura mista in colonie singole, ognuna da una sola cellula — prerequisito per colture pure. 4 quadranti diluiscono progressivamente.
Quando serve
Isolamento microbi dal batch, purificazione colture contaminate, identificazione ceppi specifici.
- Precisione
- Colonie isolate (>1cm distanza) nei quadranti 3 e 4.
Che cosa occorre
- Ansa da inoculo
- Becco Bunsen ad alcool
- Piastre PetriPre-sterilizzate Ø 90-100mm
Come si fa
- Primo quadrante — deposito inizialeSterilizza ansa, raffredda 5s, preleva piccola quantità coltura. Movimenti ravvicinati su 1/4 piastra (quadrante A).Perché. Quadrante A più denso — colonie sovrapposte. Carica ansa con tanto inoculo per diluzioni successive.
- Sterilizza ansa tra quadrantiFlame a rosso, 5s. CRITICO — diluzione progressiva per colonie separate finali.
- Secondo quadranteDal bordo di A, 4-5 passaggi attraverso agar verso quadrante B. Mai tornare su A.
- Terzo e quarto quadranteSterilizza, B→C; sterilizza, C→D. Colonie progressivamente più rade.
- Incuba capovolta 24-48hSigilla con parafilm. 25°C lieviti / 37°C batteri. Inverti per evitare condensa.Perché. Colonie singole nei quadranti 3 e 4 = candidate per isolamento. Una colonia = una cellula originale = cultura pura teorica.
Errori comuni
Non sterilizzare ansa tra quadranti
- Che cosa succede
- Densità uguale ovunque, no colonie singole
- Come si evita
- Flame sempre tra quadranti
Strisciare troppo profondamente
- Che cosa succede
- Graffi su agar, colonie che sanguinano nei solchi
- Come si evita
- Pressione leggera, ansa scorre sulla superficie
Il perché, in breve
Diluizione geometrica: ogni passaggio riduce inoculo 10-100×. Dopo 4 diluzioni, colonia isolata = statisticamente derivata da una cellula. Fondamento microbiologia da Koch (1881) ad oggi.
Testo della redazione di Fermentation Lab, lo stesso della Libreria dell'app. Hai trovato un errore? Scrivici: fermentationlabapp@gmail.com