A che cosa serve
Strisce API (bioMérieux) = gallerie miniaturizzate di test biochimici (fermentazione zuccheri, reazioni enzimatiche). Producono profilo numerico identificativo con accuratezza comparabile a sequenziamento per molte specie.
Quando serve
Identificazione precisa ceppi isolati da fermenti, caratterizzazione contaminanti persistenti, validazione inoculi commerciali.
- Precisione
- Identificazione livello specie 80-95% accuracy a seconda tipo API e qualità inoculo.
Che cosa occorre
- Strisce API (bioMérieux)Galleria API 50CHL/20E/yeast
- Pipetta graduataPipette di precisione 1/5/10 ml con propipetta
- Galleria API specifica (50CHL lattici, 20E Gram-, CHL lieviti)Distributori bioMérieux o e-commerce laboratorio
- Olio minerale sterile
- Acqua distillata sterile
Come si fa
- Prepara sospensione calibrataColonie fresche (24h) da piastra pura in 2ml acqua distillata sterile. Turbidità 0.5-1.0 McFarland.Perché. Turbidità bassa → falsi negativi. Alta → reazioni aspecifiche. McFarland = ~1.5×10^8 CFU/ml.
- Riempi i pozzettiPipetta sterile. Riempi cupole fino al segno. Test marcati ⊡ richiedono olio minerale sopra (anaerobiosi).
- Incuba 24-48hCamera umida fornita. 30°C lattici/lieviti, 37°C enterobatteri. A 24h se reazioni deboli prolunga a 48h.
- Leggi reazioni e aggiungi reagentiAlcune cupolette richiedono reagenti (ferrocianuro, naftolo) per sviluppo colore. Protocollo specifico API. Registra +/-.
- Calcola profilo numericoOgni gruppo di 3 test = numero (0-7). Set completo (es 5446114) = profilo unico. Consulta APIWEB online o libretto.Perché. APIWEB associa profili a specie. Inserisci numero, ottieni: specie, % probabilità, test discriminanti.
Errori comuni
Sospensione non abbastanza densa
- Che cosa succede
- Reazioni deboli, identificazione fallita
- Come si evita
- Standard McFarland 0.5-1.0 come riferimento visivo
Leggere prima di 24h
- Che cosa succede
- Reazioni incomplete, profilo sbagliato
- Come si evita
- Pazienta 24h minimo, 48h per crescita lenta
Sicurezza
- Alcuni reagenti (Gram-) sono caustici — proteggi occhi
Il perché, in breve
Ogni specie ha pattern metabolico unico. 20-50 reazioni biochimiche = fingerprint quasi-univoco. APIWEB contiene 600+ specie, aggiornato continuamente da ricerca accademica e industriale.
Testo della redazione di Fermentation Lab, lo stesso della Libreria dell'app. Hai trovato un errore? Scrivici: fermentationlabapp@gmail.com