A che cosa serve
Piastre Petri con agar sterile coltivano, isolano, identificano microbi. Mezzo nutriente specifico; agar (alghe rosse) solidifica 32-40°C, stabile fino a 85°C.
Quando serve
Isolamento colture pure, analisi qualitative, controllo qualità starter, identificazione contaminanti.
- Precisione
- pH ±0.2 dal target, spessore 4-5mm uniforme.
Che cosa occorre
- Pentola a pressioneCapacità 6-12L, pressione 1.5-2.1 atm (121°C)
- Piastre PetriPre-sterilizzate Ø 90-100mm
- Bilancia di precisione 0.01gFondo scala 200-500g, precisione 0.01g, ideale per starter e inoculi piccoli
- pH-metro digitaleRisoluzione 0.01 pH, sonda intercambiabile, calibrazione 2-3 punti
- Polvere agar-agar15g/L (1.5%) · e-commerce laboratorio o alimentari
- Peptone, estratto lievito, altri nutrienti
- Acqua distillata
Come si fa
- Scegli mezzo adattoMRS Agar lattobacilli, PDA lieviti/muffe, TSA generale. MRS: 20g destrosio + 10g peptone + 5g estratto lievito + 15g agar/L.Perché. Mezzi selettivi (con antibiotici) isolano ceppi specifici. Per home-lab generico è sufficiente.
- Sciogli in acqua distillataErlenmeyer 1L, 700ml acqua, scalda bagnomaria 60°C agitando. Aggiungi ingredienti uno alla volta. Volume finale 1L.
- Sterilizza pentola pressione 121°C × 20 minTappo cotone (non ermetico — scambi gassosi). 1.5 atm × 20 min. Depressurizza naturalmente.Attenzione. Matraccio troppo pieno (>80%) può tracimare.
- Raffredda a 50°C prima di versareA 50°C agar liquido ma non cuoce ingredienti termolabili. Verifica con termometro pulito.Perché. Sotto 45°C inizia a solidificare — lavora rapidamente.
- Versa in piastre Petri (flusso laminare)Zona sterile, 15-20ml/piastra (4-5mm). Lavora veloce a matraccio semi-coperto.
- Solidifica e pre-asciugaPiastre coperte leggermente inclinate × 30 min temperatura ambiente. Solidifica in 15-20 min. Inverti e conserva 4°C max 4 settimane.
Errori comuni
Versare agar troppo caldo (>60°C)
- Che cosa succede
- Condensazione coperchio, gocce contaminanti
- Come si evita
- Raffredda a 50°C — caldo non bruciante
Spessore irregolare
- Che cosa succede
- Zone sottili seccano, spesse → condensa
- Come si evita
- 15-20ml precisi per piastra
Conservare a temperatura ambiente
- Che cosa succede
- Essiccazione in giorni, contaminazione muffe
- Come si evita
- Capovolte a 4°C, usa entro 4 settimane
Sicurezza
- Pinze o guanti termici per matraccio caldo
Il perché, in breve
Agar = polisaccaride da alghe rosse (Gelidium, Gracilaria). Si scioglie a 100°C, solidifica 32-40°C, stabile a 85°C. Permette aggiunta termolabili dopo sterilizzazione + incubazione 37°C senza liquefazione.
Testo della redazione di Fermentation Lab, lo stesso della Libreria dell'app. Hai trovato un errore? Scrivici: fermentationlabapp@gmail.com